TES PT (Prothrombin Time)
Tes PT (Prothrombin Time); adalah tes untuk
menentukan defisiensi dari jalur ekstrinsik dan bersama. Memanjang pada
Penyakit hati, Defisiensi vit K, Defisiensi F.VII,X, V, Protrombin dan
fibrinogen. dan secara umum digunakan untuk
memonitor penggunaan terapi antikoagulan oral
A.Pra
Analitik
- Persiapan
Pasien :
Tidak dilakukan persiapan khusus
- Persiapan
Sampel :
1.
Sampel darah dapat diperoleh
melalui vena punksi.
2.
Antikoagulan yang dipakai adalah
sodium sitrat 3,2 % atau 3,8 % dengan perbandingan 9:1 (9 bagian darah: l bagian Na.Sitrat).
3.
Sampel darah disentrifus 10‑15
menit dengan kecepatan 2000 rpm
4.
Penampung tidak boleh terbuat dari
bahan yang dapat menginduksi aktivasi kontak seperti gelas. Sebaiknya dipakai
penampung gelas berlapis silikon atau plastik.
§ Prinsip :
PT tahap pertama mengukur waktu bekuan dari plasma setelah penambahan
faktor jaringan (tromboplastin) dan kalsium. Rekalsifikasi dari plasma dengan
adanya faktor jaringan menimbulkan aktivasi factor X, akibatnya membentuk
trombin dan berakhir menjadi bekuan fibrin.
§ Alat:
Cara manual
·
Tabung reaksi
·
Rak tabung
·
Inkubator
·
Batang pengaduk
·
Stop watch
Cara semi
otomatik
·
Pipet
·
Stiring bars
·
Tabung tes
·
Stopwatch
·
Cuvet
·
Alat OTOMATIK
§ Bahan
· Plasma (whole blood dengan antikoagulan
natrium sitrat)
· Reagen tromboplastin yang
mengandung ekstrak lyophilized dari otak kelinci dan kalsium klorida
(dilarutkan dengan 2 ml air suling)
B. Analitik :
§ Cara kerja :
Cara manual
Ada dua cara yaitu 1 dan 2 :
Cara 1
- Reagen tromboplastin 200 µl dimasukkan dalam tabung 1
- Plasma 200 µl dimasukkan dalam tabung 2
- Tabung 1 dan 2 diinkubasi selama 3
menit dalam inkubator yang bersuhu 37 OC
- Ambil plasma 100 µl pada tabung 2,
masukkan dalam tabung 1
- Jalankan stopwatch, aduk, amati hingga
terjadi bekuan (jendolan)
- Tes diulang pada plasma kontrol
Cara 2
- Lakukan langkah 1-4 di atas
- Biarkan tabung selama 6‑8
detik dan miringkan setiap 1‑2 detik, hentikan Stopwatch ketika sudah
tampak bekuan fibrin.
Cara semiotomatik
- Siapkan sampel dan kontrol,
sebelumnya hangatkan tabung tes
- Masukkan plasma (100 µl)
kedalam tabung tes, inkubasi 3‑5 menit pada suhu, ruang
- Tambahkan
reagen PT (200 µl), saat itu juga jalankan stop watch
- Catat
waktu yang dibutuhkan membentuk bekuan (Print out)